Патоморфологическое (гистологическое) исследование

Патоморфологическое (гистологическое) исследование – это метод детального изучения организма человека с целью выявления патологического процесса на тканевом уровне. Оно имеет большое значение для верификации и определения стадии заболевания, проведения дифференциальной диагностики, динамического наблюдения в ходе медикаментозного, радиационного, хирургического, цитостатического лечения. Материал для гистологического анализа получают с помощью биопсии при визуальном контроле (эндоскопии, УЗИ, КТ, МРТ) или в ходе выполнения оперативного вмешательства. Во время проведения эндоскопического исследования желудочно-кишечного тракта, биопсия является стандартной диагностической манипуляцией.

Как проходит гистологическое исследование

Для получения достоверных результатов, очень важно взять небольшой кусочек ткани из нужного места. С целью минимизации диагностической ошибки, биопсию выполняют на границе здоровой и измененной ткани, а также с нескольких точек макроскопически «подозрительной» области. Вторым этапом успешного проведения манипуляции будет качественная фиксация материала и быстрая его доставка в лабораторию.

Перед тем, как приступить к микроскопии биологического материала, необходимо правильно приготовить препарат. Данная процедура имеет свою четкую последовательность, и правильное выполнение каждого этапа влияет на окончательный результат исследования:

  1. Фиксация. Для предупреждения разрушения структуры ткани, её обрабатывают специальным фиксирующим веществом, роль которого выполняет преимущественно формалин.
  2. Проводка. Она предусматривает дегидратацию материала с помощью последовательного погружения кусочка ткани в спирты различной концентрации. И заканчивается формированием парафинового блока– небольшого парафинового кубика, в котором заключен кусочек ткани. Несколько десятилетий назад, данный этап был довольно долговременным, технически сложным (материал последовательно погружали в разные вещества на определенное время). Сегодня, проводка осуществляется с помощью специальных приборов – гистопроцессоров, которые не только ускоряют обработку материала, но и являются более качественным способом дегидратации.
  3. Заливка препарата специальными средствами (парафин, целлоидин, и др.) После того, как ткань стала более плотной и твердой, из нее можно формировать тонкие срезы с помощью специального ножа, который называется микротом.
  4. Резка микротомом твердого блока исследуемой ткани на тонкие слои от 5 до 50 нм.
  5. Нанесение среза на предметное стекло и окрашивание препарата специфическими красителями для лучшей микроскопической визуализации отдельных структур ткани.
  6. Таким образом происходит изготовление препарата для изучения структуры под микроскопом.

Микроскопия материала проводится с целью определения вида и стадии патологического процесса. Данный этап является решающим для окончательной верификации диагноза, что позволяет врачу составить индивидуальную и наиболее эффективную программу лечения.

Методы исследования

Суть патоморфологического исследования заключается в микроскопии различных тканей человеческого организма с последующей верификацией диагноза. В зависимости от использованной аппаратуры и дополнительных веществ, разделяют такие виды гистологического анализа:

  1. Световая микроскопия. Для лучшей визуализации структур ткани, применяют поляризационные, люминесцентные, флуоресцентные, фазово-контрастные, интерференционные микроскопы, приборы с конденсором темного поля.
  2. Электронная микроскопия позволяет визуализировать малейшие структуры ткани. Современная аппаратура способна увеличить изображения до 600 тыс. раз.
  3. Методика изучения «тотальной ткани», которой является кровь, лимфа, половые клетки.
  4. Микроскопия окрашенных постоянных препаратов, изготовление которых описано выше.
  5. Прижизненное патоморфологическое исследование тканей (in vivo) – экспериментальный метод, который используется в основном на животных.
  6. Изучение временных препаратов используют в том случае, когда нужен быстрый результат. Биологический материал обрабатывают каплей воды или физиологического раствора.
  7. Метод культуры тканей применяется для изучения особенностей жизнедеятельности клеток, а именно регенерации, реакции на трансплантацию, размножение.
  8. Авторадиография – определение биохимической активности исследуемого материала путем введения в ткань веществ, которые имеют меченые атомы.

Сегодня разработанные прогрессивные методики гистологического анализа и уникальное оборудование позволяют квалифицированному патоморфологу увидеть даже самые незначительные изменения ткани, и установить корректный диагноз еще на ранних стадиях заболевания.

Видео

Видео услуги